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如何對Elisa試劑盒樣品進行正確稀釋·╃☁?
點選次數₪╃·✘│:8 釋出時間₪╃·✘│:2022-09-16
  Elisa試劑盒採用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗↟✘•│。計算方法是以標準物的濃度為橫座標•▩,OD值為縱座標•▩,在半對數座標紙上繪出標準曲線•▩,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程式•▩,將樣品的OD值代入方程式•▩,計算出樣品濃度•▩,再乘以稀釋倍數•▩,即為樣品的實際濃度↟✘•│。
 
  Elisa試劑盒在沒有去離子水或雙蒸水時•▩,可以使用娃哈哈純淨水配製溶液•▩,切勿使用自來水↟✘•│。
 
  1.樣品稀釋₪╃·✘│:酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應•▩,如果血清不稀釋•▩,不可避免會產生很強的非特異性反應•▩,出現假陽性↟✘•│。因此•▩,國外檢測血清抗體的試劑盒•▩,均規定將血清稀釋至適當的倍數•▩,以降低非特異性反應•▩,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來↟✘•│。樣品稀釋倍數均透過大量試驗確定•▩,以保證試驗的靈敏度和特異性↟✘•│。但是•▩,有些使用者未能嚴格按使用說明書操作•▩,如產品應取10u1樣品進行稀釋•▩,個別使用者取5u1甚至1u1樣品進行稀釋•▩,由於吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠•▩,因此造成樣品稀釋倍數不準確•▩,檢測結果出現問題↟✘•│。
 
  2.試劑盒平衡₪╃·✘│:試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃)•▩,一般需在室溫放置20~30分鐘以上↟✘•│。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠•▩,樣品孵育時間相對縮短•▩,ELISA反應不夠充分↟✘•│。冬季室溫低•▩,可將試劑盒開啟盒蓋置37℃溫箱20分鐘↟✘•│。稀釋前│✘、後的樣品需要充分混勻•▩,所有試劑在加樣前也須搖勻•▩,以保證試驗的均一性↟✘•│。
 
  3.加樣₪╃·✘│:儘量操作規範•▩,將液體垂直懸空快速加入到微孔板中•▩,避免加到孔避上↟✘•│。加完試劑後用手適當振盪或在桌面適當作圓周運動•▩,使孔內試劑充分混勻•▩,蓋好蓋板膜↟✘•│。
 
  4.洗板₪╃·✘│:洗液儘量不要溢位孔外;加洗液後要靜置10-15s•▩,甩去板孔中洗液後•▩,一定要用力拍幹;及時更換吸水紙•▩,尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去•▩,否則可能影響試驗結果↟✘•│。

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